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亲子鉴定原理

时间:2017-03-14 11:54 点击:
亲子鉴定的依据
    1、遗传特征的分析     
       遗传标记的概念(genetic marker)
2、妊娠期限的检查(280±14天)
3、性交及生育能力的鉴定
 
亲子鉴定的原理
方法:分析单基因遗传特征         
原理:所用的遗传标记遵守孟德尔遗传规律和终生不变。 
 
 
判定父子关系的基本原理:     
   在肯定某个基因必须来自生父,而被控父亲并不具有这个基因的情况下,可以排除亲子关系;
   在肯定某个基因必须来自生父,而被控父亲具有这个基因的情况下,则不能排除其亲子关系;
                                                        ——父权概率
 
 
线粒体DNA多态性→母系单亲的亲子鉴定 
Y 染色体DNA多态性→父系单亲的亲子鉴定 
 
 
基因产物水平的遗传标记 
     一、红细胞血型
     指由等位基因决定的红细胞表面抗原的差异,为最早用于亲子鉴定的遗传标记,有ABO、MN、P、Rh等21个血型系统。
   简单遗传性状,符合孟德尔遗传规律
    遗传多态性,不易受年龄、性别、疾病影响
操作简单、重复性好,结果明确
二、红细胞酶型 
      指红细胞多态性同工酶个体间的差异,如EAP、ESD、PGM1等
      方法:电泳分离+酶谱技术
三、血清蛋白型 
       指由等位基因决定的人血清中同一种蛋白质的个体差异,又称血清型,如结合珠蛋白型,维生素D结合蛋白型,α1一抗胰蛋白酶型等。
       方法:电泳分离+蛋白染色/免疫印迹技术。
四、白细胞型
     指人类白细胞抗原(HLA),又称移植抗原或组织相溶性抗原系统,包括A、B、C、D、DR、DQ、DP等基因产物,具有高度遗传多态性,是最复杂的人类遗传标记。
     方法:微是量淋巴细胞毒试验;混合淋巴细胞培养。
 
DNA水平的遗传标记
一、DNA的结构与功能
二、DNA多态性的分子学基础 
(一)序列多态性 
      指在两条同源染色体上,同源DNA序列长度相等,但个别核苷酸不同而产生的个体差异,也称单核苷酸多态性(SNP)。
(二)长度多态性
     指由于片段插入、缺失或重复序列数目变异所致的DNA片段长度的个体差异。
类型:散在重复序列
            串联重复序列、倒位重复序列
 
DNA多态性的检测技术
(一)DNA指纹(DNA fingerprint)技术 
           将生物检材中细胞核的DNA分离出来,用特定的限制性内切酶消化,后经电泳分离,Southern印迹转移,再用已知序列小卫星DNA探针根据碱基互补 原则进行杂交,用放射自显影等技术显示出一系列不等距离,相互间隔的多条电泳谱带组成的高度多态性图谱,实质为DNA的限制性片段长度多态性(RFLP) 图像,因各人不同(同卵双生除外),比对结果类似指纹,故称DNA指纹图谱。 
特点:
(1)体细胞稳定性
(2)个体高度特异性
(3)按孟德尔遗传规律遗传 
(二)聚合酶链式反应(PCR)技术
        是依赖于靶DNA序列侧翼上所结合的两个寡核苷酸引物,在体外由DNA聚合酶催化合成特异性DNA片段的方法,又称体外基因扩增方法,目的是从生物体的整个基因组DNA中获取足够量的特异性片段,以供进一步分析。
特点:灵敏度高,特异性中,操作简单、快速。
PCR产物的类型及作用:
(1)扩增片段序列多态性
(2)扩增片段长度多态性(AMP-FLP)
         来自基因组DNA中小卫星或微卫星位点。
STR是应用最广泛的遗传标记系统
(1)基因位点多、多态性高,扩增片段短。
(2)扩增片段长度相差不大,利于进行多个STR位点的复合扩增。
(三)DNA芯片(DNA chip)技术
 
 
亲子鉴定结果的评估
一、排除亲权关系
      指分析受检者之间的遗传标记,发现不遵循遗传规律。
  1、只有1个遗传标记违背遗传规律,应加测其他系统;
  2、有2个遗传标记排除,应具体分析;
  3、有3个或以上遗传标记排除,可排除亲子关系;
二、肯定亲权关系 
    指分析遗传标记未发现违背遗传规律,可能存在亲生关系;
根据下列指标肯定亲权关系:
  1、实验检测遗传标记的累积非父排除率≥99.95%;
  2、假定父亲的累积父权指数>2000,或在前概率相同条件下,假定父亲的相对父权机会≥99.95%。
  1、只有1个遗传标记违背遗传规律,应加测其他系统;
  2、有2个遗传标记排除,应具体分析;
  3、有3个或以上遗传标记排除,可排除亲子关系;
三、单亲亲子鉴定结果的评估
       指只有单亲参与亲子鉴定 
方法:
  1、根据遗传标记是否违反遗传规律进行排除。若无法排除亲权关系,在亲子鉴定的各位点的累积非父排除率>0.9990,计算其父权概率≥0.9990,可肯定亲子关系。
  2、利用不能参与一方的直系亲属(父母、兄、妹)的DNA进行鉴定。
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